(25)いまさら聞けない「絶対検量線法、内標準法、標準添加法」

今回は、HPLC法の定量法について紹介します。

HPLC法での定量には、絶対検量線法、内標準法、標準添加法が用いられます。
それぞれの方法について、簡単に説明をしますが、正しい表現が必要な場合は、JISを参考にしてください。 

〇絶対検量線法：
測定したい成分の標準試料だけで検量線を作成して、試料中の濃度を求める方法 

〇内標準法：
測定したい成分の標準試料に一定濃度の内標準物質を加え、成分ピークの面積と内標準物質のピーク面積との比を縦軸とする検量線を作成して、試料中の濃度を求める方法 

なお、内部標準物質、内部標準法という用語が通用していますが、現在、JISなどでは、内標準物質、内標準法に統一されています。 

〇標準添加法：
一定量の試料溶液に測定したい成分の標準液を段階的に加えて、得られた直線をｘ軸まで外挿して、未知試料中の濃度を求める方法 

内標準法と標準添加法は、文章にすると分かりにくいですよね。
島津製作所のHPによい図がありましたので、引用します。 

図１　内標準法

上：標準試料：目的成分　100 ppm、内標準物質　100 ppm
下：未知試料：目的成分　不明、　　内標準物質　100 ppm
未知試料中の成分濃度=100ppm（未知試料中の内標準物質濃度）×0.7／1.2＝58 ppm 

図２　標準添加法

 未知試料中の成分濃度の濃度は横軸（添加量）との交点の絶対値で表され、 成分の濃度は50ppmとなります。 

参考文献 ：
JIS K 0214:2013　分析化学用語（クロマトグラフィー部門），p.24, p.35，日本規格協会（2013）． 

引用文献 ：
島津製作所HP
https://www.an.shimadzu.co.jp/service-support/technical-support/analysis-basics/gc/fundamentals/quantitative-method/index.html#gc_2_4_4 

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